Перейти к верхней панели

Иммунохемилюминесцентный анализ, что это?

На этой странице находиться только текст статьи. Полная статья с картинками и таблицами находится здесь.
Для просмотра требуется программа Adobe Reader.

Современные молекулярные технологии лабораторной диагностики
Э.Р. Янбухтина, педиатр, дерматовенеролог, ООО «Лаборатория Гемотест»
Е.Ю. Сухарева, биохимик, ООО «Лаборатория Гемотест»
А.М. Тазетдинов, к.б.н., ООО «Лаборатория Гемотест»
Внедрение новейших молекулярных технологий лабораторной диагностики в клиническую практику открыло невиданные ранее горизонты во многих областях медицины, в частности, в области определения и выявления причин аллергии, воспалительных реакций, аутоиммунных и системных заболеваний, инфекций, передаваемых половым путем, вирусных гепатитов, а также в определении генетического риска развития многих наследственных болезней. Высокий уровень автоматизации, производительности, точности, достоверности, надежности, чувствительности проводимых исследований проливает свет не только на молекулярные основы, лежащие в основе патогенеза заболевания, но и на новые возможности их идентификации, оценки риска развития, возникновения, профилактики, выявления и лечения.
Необходимым условием развития лабораторного обеспечения специализированной и качественной медицинской помощи населению помимо стандартизации лабораторных исследований, является применение соответствующих высокотехнологичных методов диагностики, обладающих высокой чувствительностью и специфичностью в соответствии с современным уровнем научно­технического прогресса. К числу таких известных и распространенных методов диагностики относятся: микроскопическое и бактериологическое исследования, иммуноферментный анализ (ИФА), иммуно­хемилюминесцентный анализ (ИХЛА), полимеразная цепная реакция (ПЦР) и секвенирование. В настоящее время молекулярно­генетические анализы, основанные на современных методах­ ПЦР, секвенирование, являются неотъемлемой частью диагностики и выбора лечения, востребованы в фармакогенетике, спортивной и судебной медицине. Пирофосфатная технология секвенирования нового поколения – пиросеквенирование, позволяет с высокой производительностью и точностью осуществлять прочтение нуклеотидной последовательности, проводить идентификацию вирусов, бактерий, грибов, выявить их мутации и резистентность к антимикробным препаратам, может с успехом применяться при расшифровке абсолютно неизвестных последовательностей ДНК и скрининге клинически значимых полиморфизмов и мутаций (однонуклеотидные полиморфизмы – SNP, SNV, CNV). Принцип метода основан на регистрации фотоумножителем или цифровой камерой биолюминесценции при окислении люциферина люциферазой, которое запускается АТФ, образующегося из пирофосфата в присутствии сульфурилазы и аденозинфосфосульфата. Существенной особенностью современной технологии пиросеквенирования является использование эмульсионной ПЦР для одновременной параллельной подготовки сотен тысяч препаратов ДНК, наличие специальных проточных камер с сотней тысяч микролунок, заполняемых шариками с образцами анализируемой ДНК и микрошариками с иммобилизованными ферментами, высокочувствительной цифровой фотокамеры и специализированного программного обеспечения. Дизайн праймеров для амплификации и секвенирования интересующих генетических локусов при подготовке образца открывает необычайно широкие возможности для изучения практически любого интересующего участка генома, идентификации мутации в соответствующих хромосомных регионах, разработки неограниченного количества новых диагностических комплексов по выявлению патогенных микроорганизмов, потенциального риска возникновения и развития инфекционных, моногенных, мультифакториальных заболеваний, их диагностики на начальных стадиях развития и прогноза течения, оценки эффективности и индивидуальной переносимости лекарственных препаратов. Поскольку наследственные факторы играют важную роль в возникновении многих хронических болезней человека в настоящее время разработаны соответствующие тест системы для выявления предрасположенности пациента к сердечно­сосудистым заболеваниям, невынашиванию беременности, врожденным порокам развития плода, раку молочной железы и яичников, патологии системы свертывания крови, ожирению, остеопорозу, артериальной гипертензии, установления причин бесплодия. Успешный опыт использования современных молекулярно­генетических методов в медицинской практике, несомненно, будет основанием не только для увеличения количества генетических анализов, но и спектра проводимых исследований по выявлению наследственной предрасположенности к моногенным и мультифакториальным заболеваниям, для медико­генетической консультации, при индивидуальном подборе наиболее эффективных лекарственных средств и определении их оптимальной дозировки.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярной диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того, как заболевание может себя проявить.
Полимеразную цепную реакцию (ПЦР) в 1983 году разработал Кэри Мюллис (США), за что в 1993 году он удостоен Нобелевской премии в области химии.
ПЦР анализ стал для большинства инфекций своеобразным «золотым стандартом диагностики». Большинство специалистов сталкиваются с ним практически ежедневно и не представляют без него постановку окончательного диагноза. ПЦР нередко становится единственной реакцией для выявления активных стадий заболевания в те моменты, когда не срабатывают другие бактериологические, вирусологические, иммунологические методы диагностики.
Инфекции выявляемые с помощью ПЦР­диагностики:
1). ВИЧ­инфекция (можно выявить вирус иммунодефицита человека ВИЧ­1);
2). Вирусные гепатиты А, В, С, G (РНК­HAV, ДНК­HBV, РНК­HCV, РНК­HGV);
3). Инфекционный мононуклеоз (ДНК вируса Эпштейн­Барр­ВЭБ);
4). Цитомегаловирусная инфекция (ДНК­CMV);
5). Герпетическая инфекция (ДНК­ вируса простого герпеса ВПГ 1 и 2 типа);
6). ИППП (инфекции, передающиеся половым путем) – уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз
7). Туберкулез (микобактерия туберкулеза);
8). Онкогенные вирусы – папилломавирусная инфекция (вирус папилломы человека, в том числе его онкогенные виды 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58, и 59);
9). Боррелиоз, клещевой энцефалит;
10). Листериоз;
11). Кандидоз (грибы рода Candida);
12). Хеликобактерная инфекция (Helicobacter pylori)
и другие.
В настоящее время ПЦР­диагностика подвергается существенному развитию. Происходит совершенствование самого метода, вновь и вновь появляются новые разновидности ПЦР, на медицинский рынок поступают новые тест­системы на основе данной реакции.
Одним из новейших исследований является высокочувствительный ВПЧ­тест Cobas. Он является качественным тестом для выявления ВПЧ (вируса папилломы человека) высокого риска. В тесте проводится амплификация ДНК мишени методом ПЦР с детекцией в реальном времени, в процессе которой амплифицированная ДНК идентифицируется с помощью меченых флуоресцентным красителем зондов.
Как и другие тесты для выявления ВПЧ, тест Cobas позволяет выявлять все основные генотипы ВПЧ, вызывающие рак шейки матки. Основное отличие заключается в том, что тест Cobas позволяет генотипировать типы 16 и 18 отдельно. При этом используется ?­глобин в качестве внутреннего контроля качества образца, что исключает перекрестную реактивность с типами ВПЧ низкого риска. Таким образом, чувствительность и специфичность теста составляют более 95%.
Тест Сobas® HPV – это 3 теста на ВПЧ высокого онкогенного риска в одном для надежного распределения по степени риска.
В одном результате выдается объединенный результат выявления ДНК 12 типов ВПЧ высокого онкогенного риска: 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 и индивидуальные результаты генотипирования ВПЧ 16 и 18.
Высокочувствительный Сobas® HPV Test является диагностическим исследованием, одобренным FDA, сертифицированным в ЕС и зарегистрированным в России, и позволяет узнать детали, которые необходимы для принятия решения по тактике ведения пациентки на основании ее реальных рисков.
Тест Cobas HPV Test дает возможность для создания новых стандартов скрининга, так как:
Значительно помогает распределению пациентов по группам риска;
Позволяет сфокусироваться на небольшой группе пациентов, которые действительно нуждаются в немедленном лечении;
Позволяет сообщить большинству женщин, что они находятся в группе очень низкого риска.
Развитию молекулярной аллергодиагностики способствовало открытие аллергена как сложного комплекса, в состав которого входят различные белковые молекулы.
На основе этих открытий шведская компания Phadia AB разработала систему ImmunoCAP, признанную Всемирной Организацией Здравоохранения «золотым стандартом аллергодиагностики», и на сегодняшний день используемую более чем в 100 странах мира.
Это современная тест­система in­vitro диагностики, которая позволяет обнаружить сверх низкие концентрации IgE­антител в сверх малом количестве крови пациента.
In­vitro исследования крови имеют определенные преимущества в отличие от кожных прик­тестов, которые на протяжении длительного времени являются основным уточняющим методом диагностики аллергических заболеваний:
Безопасность для пациентов, возможность использовать в любой период заболевания, в любом возрасте;
Нет зависимости от антигистаминных препаратов или присутствующего дермографизма, повышенной реактивности кожных покровов;
Проведение множественных исследований с одним образцом крови;
Новое поколение тестов является высокочувствительным и специфичным, выдающим результаты в количественном виде, характеризующим степень сенсибилизации организма данным аллергеном.
Диагностика аллергии по анализам крови – это современное направление в аллергологии, которое позволяет не только выявить причину аллергии и дифференцировать истинную и перекрёстную сенсибилизацию организма, но и наблюдать эффективность проводимого лечения.

журнал «Поликлиника» 4(1) 2014 стр.64

Москва. 10 июля. INTERFAX.RU — По результатам четвертого этапа ИФА-тестирования (ИФА — иммуноферментный анализ), который прошел с 19 июня по 2 июля, у 21,7% москвичей формируется иммунитет к коронавирусной инфекции, сообщила заммэра Москвы по вопросам социального развития Анастасия Ракова журналистам в пятницу.

«Мы продолжаем масштабный проект по исследованию популяционного иммунитета жителей к коронавирусу», — сказала Ракова. «При этом темп иммунизации постепенно снижается, за последние две недели — с 2,5 до 1,8%. Это вполне закономерно, поскольку заболеваемость среди москвичей также снижается: анализ в период исследования популяционного иммунитета показал снижение доли болеющих жителей по данным ИХЛА-тестирования (ИХЛА — иммунохемилюминесцентный анализ — ИФ) — с 3,9 до 3,1%, а по ПЦР-исследованиям — с 2,4% до 1,2%», — добавила заммэра.

По результатам третьего этапа исследования популяционного иммунитета к COVID-19 антитела к коронавирусной инфекции обнаружены у 19,9 % москвичей, то есть идет рост. В четвертом исследовании приняли участие 98 тысяч человек, сказала она.

По словам Раковой, увеличение доли жителей, у которых выработались антитела к COVID-19, фиксируется как в целом по Москве, так и в разрезе административных округов.

Она напомнила, что по-прежнему любой житель столицы имеет возможность записаться в один из 30 пунктов сдачи крови и бесплатно пройти тестирование на наличие антител к заболеванию.

Кроме того, почти месяц назад в Москве был запущен совместный проект с работодателями, которые могут протестировать сотрудников на антитела к коронавирусной инфекции методом ИФА (ИХЛА), поучаствовав в эксперименте по созданию государственно-частного партнерства. Работодатель берет на себя расходы только по организации забора крови, а исследование проводится бесплатно за счет бюджета города.

Фото .com

В Москве с 15 мая будет запущена масштабная программа тестирования горожан на наличие антител к коронавирусу. Анализы можно будет сдать бесплатно – для этого горожан будут в онлайн-режиме приглашать в поликлиники. По словам мэра Сергея Собянина, каждые несколько дней приглашения будут получать до 70 тыс. человек. Широкая диагностика позволит выяснить, сколько жителей столицы уже переболели COVID-19 даже не зная об этом, а сколько болеют в данный момент, бессимптомно, а затем на основе этих данных принимать решения о том, как в каком режиме будет жить столица.

Горожан планируют тестировать с использованием иммуноферментного анализа (ИФА), который дает возможность выявить наличие у человека в крови антител к коронавирусу. Это может показать, инфицирован ли человек сейчас или перенес ли он инфекцию в прошлом, а значит, приобрел иммунитет. По данным городских властей, в Москве есть техническая возможность уже к концу мая довести число таких исследований до 100 тыс. в сутки, а позднее – и до 200 тыс. При этом ИФА-тестирование будет идти параллельно с уже налаженным тестированием методом ПЦР. Забор крови для ИФА-тестирования будут проводить в 30 взрослых поликлиниках, в среднем – по три в каждом административном округе. В каждой поликлинике будет открыто по два процедурных кабинета.

«Иммунологический метод тестирования обладает высокой чувствительностью и специфичностью, которая составляет более 90%», – отмечает главный внештатный специалист по первичной медико-санитарной помощи взрослому населению Андрей Тяжельников. По словам врача, тестирование на количественное определение IgM – и IgG-антител к SARS-CoV-2 методом ИФА (ИХЛА) предназначено для быстрой диагностики коронавируса: «Метод особенно актуален в условиях бессимптомного носительства вируса. Иммунная система человека может продуцировать специфические антитела IgM и IgG после вирусной инфекции. Антитела IgM – самые ранние антитела, которые появляются при первой иммунной реакции и указывают на недавнюю инфекцию, что может использоваться в качестве дополнительной диагностики. IgG вырабатываются позже и остаются надолго». По словам Тяжельникова, это можно использовать в качестве индикатора, определив, был ли человек инфицирован ранее коронавирусом. «Подтверждение или исключение инфекции необходимо сочетать с оценкой клинических проявлений заболевания у пациента или другими методами», – отмечает доктор.

Глава отдела лабораторной диагностики ГБУЗ «Научно-исследовательский институт скорой помощи имени Н.В. Склифосовского ДЗМ» Михаил Годков отмечает, что часть людей переносят COVID-19 бессимптомно. «Тесты на антитела позволяют выяснить, встречался ли конкретный человек с вирусом и какой процент населения уже перенес заболевание. Когда антитела вырабатываются у 80% людей и выше, то вирус перестает активно циркулировать, – сообщил Годков. – Еще одно применение тестов на антитела – это дополнительная диагностика. Случается так, что вирус размножается медленнее, чем иммунный ответ. В таком случае, обычный тест на COVID-19 покажет отрицательный результат, и только по тесту на антитела можно будет определить, является ли человек носителем вируса или нет. Данный метод дополняет очень хорошо ПЦР диагностику».

Определение наличия антител – важный этап диагностики любого инфекционного процесса, говорит заместитель главного внештатного специалиста по инфекционным болезням в Москве Елена Цыганова. По ее словам, возможность определять антитела методом ИФА/ИХЛА важна потому, что позволит провести скрининговое тестирование большого количества горожан: «Для проведения теста проводится забор крови, затем анализатор определяет наличие антител IgM и IgG. Именно наличие этих иммуноглобулинов и позволяет определить стадию заболевания – активное заболевание, перенесённая инфекция, а также бессимптомное течение болезни».

По словам Сергея Собянина, результаты скрининга будут подводиться еженедельно – в целом по городу и в разрезе административных округов. «Эти данные будут публиковаться на портале mos. ru и станут основой для принятия управленческих решений, связанных с планированием работы медицинской системы и сохранением либо смягчением действующих ограничений», – сообщил мэр, обратившись к горожанам. – Прошу вас, дорогие друзья, максимально ответственно относиться к приглашениям прийти в поликлинику и пройти ИФА-тест. Тем самым вы внесете свой вклад в приближение победы над коронавирусом».

Так все-таки надо обследовать огромные группы людей или пользы в этом нет?

Многие из исследований на антитела к коронавирусу за рубежом проводились на ограниченных социальных или профессиональных группах, иногда числом всего в несколько сотен человек. Претензии к одному из первых и широко обсуждавшихся исследований такого рода — тестированию 3300 жителей графства Санта-Клара в Калифорнии в апреле — сводились к критике выборки тестируемых и доли ложно-положительных результатов в использованном тесте.

При этом многие утверждают, что именно ограниченное тестирование в отдельных группах — скажем, среди врачей — может дать какую-то полезную пищу для размышлений. Автор одной из тест-систем, недавно зарегистрированных и используемых в коммерческой лаборатории, Григорий Ефимов из НМИЦ гематологии говорит, что для полноценных выводов не подходят, к примеру, данные коммерческих лабораторий.

«Там выборка не будет репрезентативной — пришли те люди, которые имеют основание думать, что они переболели, и это будет очень сильно искажать статистику. Для того, чтобы получать настоящую статистику, надо действительно брать случайных людей», — считает он. Ефимов не видит вреда в том, что, пусть и с какой-то вероятностью статистических ошибок, такое массовое тестирование состоится.

Михаил Фаворов из DiaPrep System говорит, что системного подхода к тестированию на антитела нет. «Популяционные исследования иммунитета к респираторным вирусам — хорошо известная вещь. Они должны проводиться на основе выборки групп населения и методов научно обоснованной статистики. Но это должны делать специалисты аналитической эпидемиологии, которых в России не готовили даже в позднейший период, не говоря уж о временах СССР». Он подчеркивает необходимость создания национального органа по сертификации тестов на антитела, но говорит, что это вступит в противоречие с коммерческими и научными интересами тех, кто заинтересован в продвижении своих разработок.

В условиях беспрецедентной пандемии безусловную ценность московского скрининга на антитела отмечает вирусолог, доктор биологических наук Алексей Аграновский. «Это большие числа. Это все же дает картину того, сколько человек переболели в популяции. И другого способа получить ее не существует. Пускай даже и будет ошибка в три-четыре процента, я не считаю ее фатальной. Массовый скрининг даст возможность, принимая во внимание большую надежность иммунологического теста в сравнении с ПЦР (тот самый мазок у больных в активной фазе — ред.), установить реальный процент переболевших, эффективность принятых мер. Что нам ждать, насколько высока прослойка иммунной защиты в популяции. Эти данные можно получить только «в поле», их нельзя вычислить».

Но в скрининг я, по статистической вероятности, не попаду. А что у частных лабораторий, чьи тесты лучше?

В России зарегистрировано около 20 тестов на антитела к коронавирусу, как иностранных, так и российского производства. Их авторы и владельцы, естественно, подчеркивают надежность и точность своей технологии. К примеру, на совещании по генетическим исследованиям с президентом Путиным директор Института молекулярной биологии им. Энгельгардта академик Макаров заявил, что в глобальном исследовании тест-систем на антитела к коронавирусу «была и наша система. Хочу отметить, что она заняла хорошее место, первое-второе поделила».

Никаких ссылок на это исследование академик не привел, и понадобилось некоторое время, чтобы понять, что речь идет об антигенах, переданных из университета Маунт-Синай в США в Россию, на которых ИМБ теперь делает свои наработки.

Помимо бесплатного московского скрининга услуги по выявлению антител к коронавирусу предлагают несколько коммерческих лабораторий («Хеликс», Genetico, «Инвитро», «Гемотест», KDL, GMS Moscow, Hadassa). Не все из них указывают, чьи тесты используются.

Оплатив такой тест, вы сможете с какой-то вероятностью утверждать, что переболели новым коронавирусом. Гарантировать, что вы не заболеете им снова, сейчас не возьмется ни один из многих тысяч ученых, работающих по всему миру над разгадкой тайн 2019-nCoV.

При участии Николая Воронина и Светланы Рейтер

  • Что нужно знать о коронавирусе? Ответы на главные вопросы
  • Коронавирус: каковы симптомы и как от него защититься?
  • ИНСТРУКЦИЯ: Как самоизолироваться?
  • КАРТА: Как коронавирус распространяется по планете

Что московские власти надеются выяснить?

Ответим словами московского мэра Сергея Собянина: «Мы будем точно знать, какая доля москвичей переболела коронавирусом и приобрела иммунитет, сколько человек инфицированы или имеют подозрение на коронавирус. И главное — какова реальная динамика распространения инфекции».

Рассказывая о начале программы на сайте mos.ru, столичный мэр подчеркивает, что тест на антитела дополнит картину, которую давали тесты собственно на ковид, которые собирали у тех, чьи симптомы проявлялись открыто. И он неоднократно употребляет слово «иммунитет».

Между тем вот именно с иммунитетом к новому коронавирусу все еще совсем далеко от ясности. И тесты на антитела эту ясность пока внести не могут.

Что такое антитела? Если их нашли у меня, значит я больна?

Антитела — свидетельство того, что ваш организм уже сталкивался с инфекцией. Как и почти со всем, что связано с новым коронавирусом, сейчас нельзя сказать точно, какую именно роль играли антитела в общем ответе организма на Covid-19. Являлись ли они просто реакцией на встречу с вирусом или же имеют защитную функцию — неизвестно.

Но, анализируя тест, обращают внимание на присутствие иммуноглобулинов двух типов — IgM и IgG. Упрощая, можно сказать, что присутствие IgM говорит о том, что инфекция была перенесена недавно, IgG — о том, что со времени заражения уже прошло какое-то время.

Вот как эту разницу объясняет Михаил Фаворов, эпидемиолог и президент американской компании DiaPrep System: наличие маркера IgG говорит о том, что был контакт с вирусом. А IgМ является маркером периода болезни. «Если у Вас оба маркера (IgG, IgМ), то вы переболели (большинство без симптомов), и это было недавно (1-3 месяца, но у некоторых до 6-ти). Если у вас только IgG, то Вы уже реконвалесцент (выздоровевший — ред.) и могли встретиться с вирусом какое-то время назад», — пишет Фаворов.

Что ждет тех, у кого скрининг выявит антитела?

В заявлении мэра говорится и о том, что «потенциальные носители инфекции должны будут брать больничный и проходить самоизоляцию». Как конкретно это будет определяться, не говорилось. Но некоторую ясность внес документ, появившийся на сайте «Федерации лабораторной медицины». Это — решение «Клинического комитета по Covid-19» от 12 мая.

Судя по решению «Клинического комитета», власти нервирует любое обнаружение антител. Как тех, что свидетельствуют о недавно перенесенной болезни, так и тех, что относятся к сравнительно давнему иммунному ответу.

  • Ваш консультант по Covid-19 объясняет все как есть — коротко

В решении «Клинического комитета» содержится таблица интерпретации диагностических тестов. Данные по маркерам IgM равные или больше 1,0 и IgG с любым значением будут говорить о «стадии иммунологического ответа на вирус SARS-CoV-2». И могут повлечь за собой самоизоляцию на две недели, а «с учетом особенностей клинического процесса до 3 недель». Показатели IgM меньше 1,0 и IgG равных или больше 10,0 означают «наличие иммунологической памяти на контакт с вирусом SARS-CoV-2» и, если нет информации о ранее перенесенной новой коронавирусной инфекции, тоже могут означать самоизоляцию на 2 недели.

И лишь только низкие показатели (IgM меньше 1,0 IgG меньше 10,0 ) говорят об «отсутствии контакта с вирусом SARS-CoV-2 или отсутствии антител в диагностически значимом количестве». Тем у кого такие результаты, рекомендовано «соблюдение общих правил по предотвращению инфицирования».

Би-би-си попыталась связаться с президентом «Федерации лабораторной медицины», руководителем отдела лабораторной диагностики института им. Склифосовского Михаилом Годковым, который значился одним из участников совещания 12 мая. Годков был недоступен, а вскоре документ исчез с сайта Федерации.

Вскоре после публикации этой статьи департамент здравоохранения Москвы заявил, что никаких мер, о которых повествует таблица интерпретации диагностических тестов, не существует. «Информация не соответствует действительности. Якобы утвержденных алгоритмов, о которых говорится в материалах, не существует. Пациентам, у которых выявлены иммуноглобулины G, говорящие об иммунитете к вирусу, никакие постановления или предписания о самоизоляции не выдаются», — утверждает департамент.

Просьбы Би-би-си уточнить происхождение документа и суть принятых решений, направленные в депздрав перед публикацией статьи, пока ожидают ответа. Интересно, что слово «алгоритм» не использовано в этой статье, но содержится как раз в упомянутом решении.

Так я не понял. Если у меня нашли антитела, то я уже не заболею ковидом?

Вопрос, что называется, на миллиард долларов, если учесть экономические потери от пандемии. Но ответить на него однозначно пока никто не может. «Есть антитела просто как свидетель того, что контакт с инфекцией был, но они не обладают нейтрализующей активностью», — подчеркивает автор одного из зарегистрированных недавно тестов на антитела, российский ученый Григорий Ефимов из НМИЦ гематологии минздрава РФ.

Специалисты предполагают (однако и это не 100-процентная уверенность), что наличие достаточной концентрации антител в первые недели после выздоровления существенно уменьшает шансы на повторное заражение. Однако как долго они сохраняют защитную функцию, неизвестно. «В настоящий момент нет никаких свидетельств того, что люди, которые выздоровели от Covid-19 и имеют антитела, защищены от повторного инфицирования», — заявила Всемирная организация здравоохранения.

В исследованиях пациентов, переболевших другой коронавирусной инфекцией, атипичной пневмонией SARS 2003 года, отмечалось, что с годами антитела к вирусу исчезали и организм переставал узнавать его. Есть и другие коронавирусы, иммунитета к которым наш организм не приобретает.

Ой. Еще коронавирусы? А тесты хорошо отличают одни от других?

С учетом нового 2019-nCoV, коронавирусов, способных заразить человека, сейчас известно семь. Взять хотя бы банальную простуду — ее тоже могут вызывать коронавирусы, только других видов.

Часть проблемы с тестированием — в том, что иммунный ответ на прочие коронавирусы и на другие инфекции может давать ложное указание на наличие антител к 2019-nCoV, снижая, таким образом, специфичность теста. Эти ложные срабатывания на другие следы завышают показатель ложно-положительности в тесте.

Его недостаточная чувствительность, напротив, упускает тех, кто действительно носит в себе следы инфицирования новым коронавирусом. А значит, будет много ложно-отрицательных. В идеальном тесте не должно быть ложно-положительных или ложно-отрицательных срабатываний.

Но идеальных тестов нет. А что считать хорошим тестом?

Уже через несколько недель после начала пандемии в разных странах стали появляться тесты на антитела к новому вирусу. И специфичность, и точность многих из них не выдерживали критики. Опрошенные специалисты сходятся в том, что показатели чувствительности и специфичности ниже 96-94% нельзя считать приемлемыми.

Проблема еще и в том, что многие производители не указывают отдельных показателей по ложно-положительным и ложно-отрицательным срабатываниям в своей продукции. Да к тому же рекламируемая точность отнюдь не всегда является реальной. Но даже если точность и не дотягивает всего три-четыре процента до абсолютной, простор для ошибки статистически весьма велик, подчеркивают те, кто скептически относятся к идее массового тестирования на антитела.

95 из 100? Какой может быть скепсис?

Спросите математиков. Объяснение упирается в концепцию Положительной прогностической ценности (Positive Prediction Value): в огромной группе исследуемых с низким количеством реально переболевших (предполагают, что это все-таки считаные проценты от общего числа жителей) даже небольшие доли погрешности в тестах в итоге очень сильно размывают определенность результата.

В условной группе из 100 тысяч тестируемых с 1% переболевших тест с 95-процентными показателями чувствительности и специфичности приведет к тому, что вероятность верного результата у каждого протестированного сведется всего к 16%. Специалисты подчеркивают, что такой тест точно нельзя делать тем, кто, скажем, отправляется работать в «красную зону», надеясь, что выявленные антитела к коронавирусу гарантируют им защиту.

Проблема в том, что для таких критических расчетов хорошо бы представлять процент переболевших. А московские власти говорят, что не представляют. И поэтому делают это массовое обследование, так как другого способа выяснить нет. Круг замыкается.

Хватит теории. Чем тестируют москвичей в этом скрининге?

Еще один хороший вопрос без четкого ответа. Несколько опрошенных специалистов в Москве уверены, что речь идет о двух тестах китайской компании Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co., Ltd., продукцию которой в России представляет компания «Миндрей медикал рус». Об этом свидетельствует и «Решение клинического комитета». Документ говорит «о запуске тестирования на количественное определение IgM- и IgG-антител к SARS-CoV-2 методом ИХЛА (иммунохемилюминисцентного анализа — ред.) с использованием оборудования Mindray».

Две ее системы для определения антител по маркерам IgM и IgG методом иммунохемилюминисцентного анализа были зарегистрированы Росздравнадзором 7 мая. Кроме этого должны были быть закуплены анализаторы крови этой же компании. О закупке анализаторов для скрининга московские власти сообщали в начале мая. Однако поставщиков не называли.

Но специалисты указывают, что большинство других тест-систем не нуждаются в особом, за пределами стандартного, оборудовании для анализа, а тесты «Миндрей» собираются в кассеты, которые затем вставляются в анализатор этой фирмы. Правда, это предположение не согласуется с заявлением мэра Москвы, который сказал, что тестирование будет идти методом иммуноферментного анализа. Такой анализ обычно не требует каких-то необычных анализаторов для исследования взятых образцов крови.

Департамент здравоохранения столицы переадресовал вопросы о производителе тест-систем в московский оперативный штаб по борьбе с коронавирусом. На момент публикации ни оперштаб, ни «Миндрей медикал рус» не ответили на вопрос о том, действительно ли эти тесты обеспечивают массовую проверку москвичей. В системе госзакупок не удалось обнаружить никаких контрактов, связанных с этим.

Хм. Ну, предположим «Миндрей». И как он?

Как говорится, все сложно. Показатели в англоязычной документации на оба теста дают чувствительность в 98% и специфичность в 96%. Но в появившихся в сети снимках русскоязычной сопроводительной брошюры показатели иные — 97% чувствительности и 93,1% — специфичности.

Екатерина Померанцева, научный консультант центра генно-репродуктивной медицины Genetico, только что зарегистрировавшего свой тест на антитела к коронавирусу, находит это странным. Она считает, что с какой-то погрешностью теста можно мириться, но для этого она должна быть точно известна. «Если ты очень хорошо знаешь, какая ошибка у системы, то ты можешь получить какую-то цифру (на исследованиях — ред.), а потом просто вычесть эти четыре процента из полученного результата. Для этого важна твоя точность представлений об этом тесте. Поэтому очень большой вопрос, насколько точно мы знаем аналитические характеристики этого теста», — говорит она.

Запрос в представительство «Миндрей медикал рус» о том, с чем может быть связано это изменение и проходили ли тесты независимую оценку, на момент публикации остается без ответа. Такая независимая оценка сейчас в ходу.

Президент DiaPrep System Михаил Фаворов сообщил, что его компания недавно исследовала шесть экспресс-тестов на антитела к коронавирусу по заказу властей «одной из стран бывшего СССР». Три из них, по словам специалиста, полностью провалились — не смогли выявить антитела вообще. И это — несмотря на заявленные в документации высокие показатели, сравнимые с теми, что дает китайская компания.

О расхождениях между заявленными в документациях и реальными показателями некоторых изученных на заказ тестов сказала и Екатерина Померанцева из Genetico.

Если на самом деле точность теста ниже, то чем мы рискуем? И для чего это вообще?

Этот вопрос впрямую связан с тем, какие цели ставят московские власти. Во-первых, Сергей Собянин говорит о принятии «управленческих решений, связанных с планированием работы медицинской системы и сохранением либо смягчением действующих ограничений».

«Это необходимо, чтобы адекватно принимать решения, связанные с ограничительными мерами, работой предприятий сферы промышленности, строительства, науки, торговли, услуг и так далее, чтобы мы понимали, куда мы идем, на какой стадии сложности находимся, оперативно и адекватно принимали необходимые меры», — сказал он в одном из недавних интервью.

Би-би-си попросила московские власти пояснить, какие конкретно решения могут быть связаны с теми или иными численными показателями московского скрининга, но ответа пока не получила. Официальные заявления Сергея Собянина пока ничего не проясняют: до сих пор все решения по ослаблению карантина ставились в зависимость от уменьшения динамики заражений на ежедневной основе, а новые данные об уже перенесенных заболеваниях не сопоставляются с ними напрямую.

В любом случае, и тут Москва пока ведет себя более консервативно, чем другие регионы. Какие конкретно эпидемиологические выводы власти намерены сделать на основе массового скрининга, пока неясно. Речь точно не идет о каких-либо дополнительных послаблениях или расширенных свободах для тех, у кого антитела найдут, и никаких «паспортов переболевших» этот скрининг не подразумевает.

Скорее наоборот. Из «таблицы интерпретации результатов» следует, что ложно-положительные срабатывания теста будут означать неудобства для тех, кого ошибочно могут отправить на карантин. Правда, Собянин оговаривается, что таким людям будут сделаны стандартные ПЦР-тесты на коронавирус. Однако и их результатов, как показывают два месяца эпидемии, иногда надо ждать долго и они также не точны.

14 Апр, 2020 | admin | No Comments

Write Reviews

Leave a Comment

Please Post Your Comments & Reviews

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *